WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 


Морфофункциональные изменения тимуса и иммунобиохимические показатели крови при воздействии цеолитсодержащим трепелом

На правах рукописи

Агафонкина Татьяна Всеволодовна

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ТИМУСА

И ИММУНОБИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ

ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ

ЦЕОЛИТСОДЕРЖАЩИМ ТРЕПЕЛОМ

03.00.25. – Гистология, цитология, клеточная биология

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Москва - 2006

Работа выполнена в Чувашском государственном университете

им. И.Н. Ульянова

Научный руководитель: доктор медицинских наук,

профессор МЕРКУЛОВА

Лариса Михайловна

Официальные оппоненты: доктор медицинских наук,

профессор ТОРБЕК

Виктория Эдуардовна

доктор биологических наук,

профессор КУРИЛО

Любовь Федоровна

Ведущая организация: Российский университет

Дружбы народов

Защита диссертации состоится «___»_________________2006 г. в «___» часов на заседании диссертационного совета Д 208.040.01 при Московской медицинской академии имени И.М.Сеченова по адресу: 119992, Москва,

ул. Трубецкая, д.8, стр.2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ЦНМБ ГОУВПО ММА имени И.М.Сеченова (117998, Москва, Нахимовский проезд, д.49).

Автореферат разослан «___»_________________2006 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета,

доктор медицинских наук,

профессор Владимир Анатольевич Варшавский

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы

Проблема иммунодефицитов во всем мире имеет большое практическое и теоретическое значение. Многие факторы — экологические, геологические, климатические, а также стрессовые и физические нагрузки — снижают иммунологическую реактивность. Иммуносупрессию различного характера и глубины также вызывают лекарственные препараты, широко используемые для лечения многих заболеваний (Крылов Ю.Ф. и др., 2005). Кроме того, на развитие иммунозависимых заболеваний влияет такой немаловажный фактор, как несбалансированное питание. Факторами риска стали ограниченное потребление натуральных неочищенных продуктов и переход к рафинированным, лишенным витаминов, минералов, клетчатки (Тутельян В.А., Суханов Б.П., 2004; Шендеров Б.А., 2006). Это негативно отражается на здоровье человека, снижая качество его жизни и трудоспособность. Хронический дефицит витаминов и минералов требует обязательной коррекции (Сусликов В.Л., 2002).

С иммунологических позиций состояние здоровья населения на современном этапе характеризуется двумя особенностями: снижением иммунологической реактивности и, как следствие этого, повышением уровня острых и хронических заболеваний с вялым, непрерывно рецидивирующим течением, плохо поддающихся антибактериальной и симптоматической терапии (Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., 2000).

Анализ многочисленных исследований по клинической иммунологии показывает, что практически при всех заболеваниях человека имеются нарушения иммунной системы (Обухова О. О. и др., 2004). Их глубина и направленность варьируют в зависимости от нозологии, формы и тяжести болезни, этиологических факторов, генетической предрасположенности, возраста, пола и т. д.

В связи с этим интерес врачей всех специальностей к проблеме иммунотерапии необычайно возрос. Препараты, оказывающие воздействие на иммунитет, стали широко применяться в клинической практике при лечении самых разнообразных заболеваний (Хаитов Р.М., Пинегин Б.В., 2003; Маркова Т. П., 2004; Лусс Л. В., 2005). В последние годы появилось большое количество биологически активных добавок, используемых для профилактики ряда иммунодефицитных состояний, а также для устранения дефицита витаминов и микроэлементов (Кульбачинский В.В., 2005; Литвинов Н.Н., Иванов В.М., 2005; Тутельян В.А., и др., 2005). Их преимуществом является то, что источником необходимых организму витаминов, минералов, аминокислот, полиненасыщенных жирных кислот, растительного волокна (клетчатки) служит растительное, животное или минеральное сырье (Гравель И.В., 2005). В литературе появились сообщения о применении минеральной биологически активной добавки – цеолитсодержащего трепела (Волков А.Н., 2000; Булыгина И.Е., 2002; Колотилова М.Л. и др., 2003). По составу он сходен с биологически активными добавками “Полисорб” и “Литовит”, рекомендованными к приему при различных патологиях (Новоселов Я.Б., Ронинсон А.Г., 1998; Потапова Г.В., и др., 2000; Чуйкова К.И., Вожаков С.В., 2005). Одним из месторождений данного вещества является село Первомайское Алатырского района Чувашской Республики, что создает для республики определенное удобство в получении препарата и его доставке, а также экономическую выгоду.

В последнее десятилетие сформировалась новая наука – нейроиммуноэндокринология. Представление о нейроиммуноэндокринных процессах играет большую роль как в понимании закономерностей функционирования организма в норме, так и для объяснения патогенеза многих иммунопатологических, нервно-психических и эндокринных расстройств (Корнева Е.А, 2003). Тимус является важным звеном кооперации нейроэндокринной и иммунной систем. Иммунорегуляторными факторами, обеспечивающими функции тимуса, наряду с цитокинами и тимическими гормонами, являются биогенные амины (Кветной И.М. и др., 1999; Hadden J.W., 1998). Несмотря на кажущуюся изученность различных структурно-функциональных характеристик тимуса, следует отметить, что роль биогенных аминов в его функции, особенно в условиях иммуностимуляции, изучена недостаточно. Всестороннее исследование влияния иммунотропных препаратов на органы иммунной системы, особенно на тканевом уровне, необходимо для избирательного, целенаправленного воздействия на нарушенные гистофизиологические процессы, что является обязательным условием успешной иммуномодуляции (Труфалкин В.А., Шурлыгина А.В., 2002).





Несмотря изученность морфофункционального состояния тимуса после иммуносупрессии на фоне приема цеолитсодержащего трепела (Стручко Г.Ю., 2003), отсутствуют сведения об изменении структуры тимуса и состоянии биоаминсодержащих структур тимуса и крови при приеме цеолитсодержащего трепела без сопутствующих патологических состояний при разной длительности кормления. Более детальное изучение иммуноморфологических изменений организации тимуса позволит выяснить точки приложения цеолитсодержащего трепела в иммунном процессе.

Цель исследования: Изучить морфофункциональное состояние тимуса и показатели крови крыс через 2, 3 и 4 недели кормления цеолитсодержащим трепелом для оценки возможных иммуномодулирующих свойств препарата.

В соответствии с целью были поставлены следующие задачи:

1. Провести морфометрию коркового и мозгового вещества долек тимуса у интактных крыс и через 2, 3 и 4 недели приема ЦТ.

2. Изучить люминесцирующие структуры тимуса, выявить изменения содержания биогенных аминов в них и определить их соотношение через 2, 3 и 4 недели приема ЦТ.

3. Изучить состояние тучноклеточной популяции тимуса в эти же сроки приема ЦТ.

4. Определить количество эритроцитов, лейкоцитов, лимфоцитов, уровень гемоглобина, а также распределение биогенных аминов в форменных элементах и плазме периферической крови у интактных крыс и через 2, 3 и 4 недели кормления ЦТ.

5. Исследовать показатели иммунограммы (уровень иммуноглобулинов, ЦИК, активность системы комплемента, фагоцитарная активность нейтрофилов) у интактных крыс и через 2, 3 и 4 недели кормления ЦТ.

6. Определить биохимические показатели крови (мочевина, креатинин, мочевая кислота, кальций, общий белок) у интактных крыс и через 2, 3 и 4 недели кормления ЦТ.

7. Провести корреляционный анализ изученных показателей.

8. Оценить и сопоставить полученные данные для определения направленности воздействия ЦТ.

Научная новизна работы:

1. Впервые в динамике прослежены изменения морфологической характеристики тимуса при приеме ЦТ: отмечено увеличение ширины коркового, диаметра и площади мозгового вещества долек тимуса.

2. Установлено, что на фоне кормления ЦТ возрастают количество и размеры люминесцирующих гранулярных клеток тимуса.





3. Впервые показано, что прием ЦТ сопровождается значительным уменьшением уровня гистамина во всех биоаминсодержащих структурах тимуса, увеличением содержания катехоламинов в структурах тимуса с максимальным повышением через 3 недели, резким уменьшением уровня всех биоаминов в люминесцирующих структурах тимуса через 4 недели приема ЦТ;

4. В работе установлено, что прием ЦТ приводит к росту количества тучных клеток за счет дегранулированных форм.

5. Впервые показано, что на фоне кормления ЦТ соотношение (серотонин + гистамин) / катехоламины в структурах тимуса и клетках крови ниже значений у интактных крыс; в структурах тимуса максимальное снижение наблюдается через 3 недели, в клетках крови – через 4 недели приема ЦТ.

6. Впервые обнаружено, что кормление ЦТ приводит к увеличению содержания IgG и IgA через 2 и 4 недели, повышению количества лейкоцитов, волнообразным и разнонаправленным изменениям показателей активности системы комплемента и уровня ЦИК.

7. Впервые установлено, что прием ЦТ приводит к нарастанию силы корреляционных взаимодействий между биогенными аминами структур тимуса и крови и показателями крови.

Научно-теоретическая значимость работы:

Материалы диссертационного исследования дополняют представление о морфофункциональном состоянии тимуса в условиях иммунокоррекции, позволяют выработать подходы к регуляции функционирования различных звеньев иммунной системы. Полученные данные об изменении биогенных аминов в тимусе и периферической крови, общих, биохимических и иммунологических показателей крови при приеме ЦТ представляют определенный интерес для гистологии и иммунологии.

Практическая значимость работы:

Результаты данного исследования могут служить обоснованием применения ЦТ в качестве иммуномодулирующего средства. Работа представляет несомненный интерес для фармакологов и практических врачей: терапевтов и иммунологов.

Результаты работы используются в учебном процессе при чтении лекций и проведении практических занятий и семинаров на кафедрах цитологии, гистологии и эмбриологии, патологической физиологии, функциональной и лабораторной диагностики Чувашского государственного университета. Итоги исследования отражены в опубликованных статьях и тезисах.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Прием ЦТ сопровождается значительным увеличением ширины коркового, диаметра и площади мозгового вещества долек тимуса, ростом количества гранулярных люминесцирующих и тучных клеток. Во всех изучаемых структурах тимуса отмечается значительное снижение уровня гистамина на всех сроках и возрастание катехоламинов, особенно через 3 недели кормления ЦТ. Через 4 недели приема ЦТ наблюдается резкое снижение уровня биогенных аминов во всех биоаминсодержащих структурах тимуса и крови.

2. Кормление ЦТ приводит к увеличению содержания лейкоцитов крови за счет абсолютного увеличения уровня лимфоцитов, повышению фагоцитарной активности нейтрофилов, уровня IgG и IgA и к некоторому снижению уровня гемоглобина и количества эритроцитов через 4 недели приема ЦТ.

3. Суммируя вышеизложенные данные, можно полагать, что ЦТ оказывает существенное влияние на иммунную систему, причем наиболее выраженный стимулирующий эффект наблюдается через 3 недели приема препарата.

Апробация работы. Основные результаты диссертации доложены на IV международной конференции по функциональной нейроморфологии “Колосовские чтения - 2002” (С.-Петербург, 2003), V Общероссийском съезде анатомов, гистологов и эмбриологов (Москва, 2004), I съезде физиологов СНГ (Сочи, Дагомыс, 2005).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 научных работ, в том числе статей – 7, тезисов в материалах международных, всероссийских научных конференций – 4.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 146 cтраницах машинописного текста (собственно текста – 110 страниц), состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов, пяти разделов собственных исследований, обсуждения результатов и заключения, выводов, списка литературы. Работа иллюстрирована 27 таблицами, 49 рисунками, включая 15 микрофотографий. Список литературы содержит 352 источника, в том числе 128 зарубежных.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Эксперименты проведены на 170 белых беспородных крысах-самцах со средней массой 200-250 г, 20 из которых были интактными. Уход и все процедуры по уходу осуществлялись по нормам и правилам обращения с лабораторными животными.

Опытные животные были разделены на три группы:

1-я – животные, в ежедневный рацион которых вводился ЦТ из расчета 5% общей массы корма в течение 2 недель (50 крыс);

2-я – животные, в ежедневный рацион которых вводился ЦТ в вышеуказанных дозах в течение 3 недель (50 крыс);

3-я – животные, в ежедневный рацион которых вводился ЦТ в вышеуказанных дозах в течение 4 недель (50 крыс).

Эксперименты проводились в осенний период. Объектом настоящего исследования служили тимус и кровь. Материал забирали под глубоким эфирным наркозом через 2, 3 и 4 недели после начала кормления трепелом во второй половине дня. Изготавливали криостатные срезы тимуса толщиной 10 мкм.

В работе использовались следующие методы:

1. Окраска гематоксилином-эозином (Ромейс Б., 1954) – в качестве общегистологической окраски с последующей морфометрией коркового и мозгового вещества тимуса.

2. Люминесцентно-гистохимический метод Фалька–Хилларпа (Falk B., Hillarp N., 1962) в модификации Е.М. Крохиной (Крохина Е.М., Александров П.Н., 1969) – для избирательного выявления катехоламин (КА)- и серотонин (СТ)- содержащих структур тимуса.

3. Люминесцентно-гистохимический метод Кросса, Эвена, Роста (Cross et al., 1971) – с целью идентификации гистаминосодержащих (ГСТ) структур тимуса и крови.

4. Метод цитоспектрофлуориметрии (Юденфренд С., 1965; Карнаухов В.Н., 1978; Калмыков В.Л., 1982) – для количественного определения уровня катехоламинов, серотонина и гистамина в аминосодержащих структурах крови и тимуса. Для этого на люминесцентный микроскоп была установлена насадка ФМЭЛ-1А при выходном напряжении 900 В. Замер интенсивности свечения производился в условных единицах (показатели шкалы регистрирующего прибора-усилителя). Для удобства подсчета цифровые значения умножали на 100. Для определения уровня серотонина использовали интерференционный светофильтр с длиной волны 525 нм, катехоламинов – с длиной волны 480 нм, гистамина – с длиной волны 515 нм.

5. Для характеристики суммарно направленного действия биогенных аминов использовалось соотношение: (CТ+ГСТ)/KA.

6. Окраска полихромным толуидиновым синим по Унна – для качественной и количественной характеристики тучных клеток тимуса. Количество тучных клеток в тимусе подсчитывали в десяти полях зрения микроскопа при увеличении об.10, ок.40. Представление о функциональном состоянии тучных клеток дает подразделение их по степени дегрануляции на четыре типа: Т-0 – тучные клетки с плотно заполненными неразличимыми гранулами и ядром; Т-1 – тучные клетки с отдельно различимыми гранулами и неполностью замаскированным ядром; Т-2 – клетки с хорошо различимыми гранулами как внутри, так и вокруг клетки и отчетливым ядром; Т-3 – опустошенные тучные клетки с единичными гранулами внутри и рассеянными гранулами вокруг клетки (Линднер Д.П. и др., 1980; Стручко Г.Ю. и др., 1995).

7. Общий анализ крови (количество эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, уровень гемоглобина и гематокрит) проводился с помощью автоматического гематологического анализатора “Sysmex” (Япония).

8. Окраска мазков крови методом Романовского–Гимза – для подсчета лейкоформулы крови (Ромейс Б., 1954).

9. Количественное определение иммуноглобулинов класса G, M и А методом радиальной иммунодиффузии (Фримель Х., 1987).

10. Определение активности системы комплемента по 50% гемолизу (Карпищенко А.И., 1999).

11. Определение уровня циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови (Карпищенко А.И., 1999).

12. Определение фагоцитарной активности нейтрофилов с латексом (Карпищенко А.И., 1999).

13. Определение биохимических показателей крови (мочевина, креатинин, мочевая кислота, холестерин, кальций, общий белок) проводилось на автоматическом биохимическом анализаторе «Dimension AR» фирмы Du Pont (США).

14. Статистическая обработка материала.

Полученные цифровые данные обрабатывались по специально поставленной программе на компьютере Pentium-200 MMX с использованием пакета программ STATISTICA, версия 6,0. В работе приводятся следующие показатели: М - средняя арифметическая величина; m - средняя ошибка средней арифметической величины. Статистическую достоверность определяли критерием Стьюдента (t) (Гублер Е.В. и др., 1973; Власов В.В., 2001; Реброва О.Ю., 2002).

15. Корреляционный анализ Пирсона применялся для нахождения связей (зависимостей) между нормально распределенными количественными признаками. Сила предполагаемой взаимосвязи между величинами определялась по значению коэффициента корреляции (Петри А., Сэбин К., 2003).

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

У интактных крыс дольки тимуса, окрашенные гемотаксилином-эозином, четко разделяются междольковыми соединительнотканными септами. Центральную часть дольки составляет светлое мозговое вещество, которое окружено более темным корковым веществом. При люминесцентной микроскопии в кортикомедуллярной зоне выявляются компактно расположенные полигональные клетки с гранулами беловато-желтого или беловато-зеленого свечения, условно названные “премедуллярными клетками” (Сергеева В.Е., Гордон Д.С., 1974). На периферии долек в субкапсулярной зоне локализованы люминесцирующие клетки с мелкими гранулами зеленовато-желтого свечения – “субкапсулярные клетки”. С помощью цитоспектрофлуориметрии установлено, что гранулы люминесцирующих клеток, а также тимоциты коркового и мозгового вещества, обладающие более слабой люминесценцией, содержат биогенные амины ГСТ, СТ и КА, преобладающим среди них является гистамин. Все структуры периферической крови также содержат КА, СТ и ГСТ. При этом наименьшая интенсивность свечения аминов выявляется в плазме, далее по нарастанию следуют эритроциты, полиморфноядерные лейкоциты и лимфоциты.

Экспериментальное введение ЦТ в пищевой рацион животных приводит к цитоморфологическим изменениям в тимусной дольке уже через 2 недели приема ЦТ: происходит достоверное увеличение ширины коркового, диаметра и площади мозгового вещества долек. Максимальное увеличение размеров долек тимуса наблюдается через 3 недели приема ЦТ, затем величина коркового и мозгового вещества несколько уменьшается, однако остается больше, чем у интактных крыс. Часть долек приобретает неправильную форму, что косвенно указывает на активацию функции тимуса.

При люминесцентной микроскопии на фоне кормления ЦТ выявляются полигональные, в том числе округлые дольки, больших, чем в норме, размеров. Общее количество люминесцирующих гранулярных клеток (ЛГК) в тимусных дольках увеличивается, причем максимальное их увеличение наблюдается через 3 недели приема ЦТ (в 1,4 раза по сравнению с интактными крысами) за счет субкапсулярных и внутримозговых гранулярных клеток.

Прием ЦТ приводит к изменениям уровня биогенных аминов в люминесцирующих структурах тимуса. Уровень СТ и КА через 2 и 3 недели возрастает по сравнению с интактным тимусом, а уровень ГСТ уменьшается на всех сроках. По истечении 4 недель приема уровень биогенных аминов в структурах тимуса по сравнению с предыдущими сроками и нормой резко снижается. Так, например, в люминесцирующих клетках субкапсулярного ряда через 2 недели уровень СТ и КА незначительно увеличивается, содержание ГСТ уменьшается почти в два раза. Через 3 недели уровень ГСТ продолжает уменьшаться, а уровень КА и СТ превышают значения у интактных крыс на 17 и 19% соответственно. Через 4 недели кормления ЦТ содержание биогенных аминов в субкапсулярных клетках резко снижается (рис.1).

Рис.1. Интенсивность свечения биогенных аминов (у.е.) в субкапсулярных клетках тимуса у интактных крыс и после приема ЦТ

Тучные клетки и тимоциты их микроокружения реагируют на введение ЦТ уменьшением уровня ГСТ через 2 недели в 1,5 раза. Через 3 недели приема ЦТ его уровень продолжает снижаться (в 1,6 раза по сравнению с предыдущим сроком), а значения СТ и КА увеличиваются приблизительно на 20%. На 4-недельном сроке, подобно изменениям в других структурах тимуса, уровни биогенных аминов также резко снижаются.

Обсуждая снижение уровня ГСТ в люминесцирующих структурах тимуса, следует принять во внимание, что, по литературным данным, ГСТ обладает супрессорной активностью, связываясь с Н2-рецепторами Т-цитотоксических клеток (Inage Z. et al., 1990), а также, действуя через цАМФ, подавляет пролиферацию и дифференцировку лимфоцитов в эффекторные клетки (Земсков А.М., 1997). Можно предположить, что снижение гистамина способствует усилению пролиферации и дифференцировки лимфоцитов. По литературным данным, КА активируют иммунокомпетентные клетки за счет стимуляции генной транскрипции и увеличения синтеза РНК, повышают хелперный эффект Т-лимфоцитов, являются модуляторами продукции ИЛ-1, ИЛ-8 и фактора некроза опухоли, активируют региональные иммунные ответы (Девойно А.Л., 1985; Visi E.S., Elenkov I.J., 2002). Поэтому увеличение уровня КА в первые 3 недели приема ЦТ в биоаминсодержащих структурах тимуса косвенно доказывает его иммуностимулирующий эффект.

Известно, что на функциональную активность клеток влияет не только абсолютное содержание биогенных аминов, но и их соотношение в клетке. Для характеристики суммарно направленного действия биогенных аминов измерялось соотношение (СТ+ГСТ)/КА, увеличение которого косвенно свидетельствует о подавлении активности клетки, снижение - о ее стимуляции (Стручко Г.Ю., 2003). Во всех структурах тимуса при приеме ЦТ этот показатель уменьшается, что говорит об активации клеток. Динамика изменения этого соотношения показана на примере тимоцитов коркового и мозгового вещества (рис.2).

Рис.2. Изменение соотношения (СТ+ГСТ)/КА в тимоцитах коркового (КВ) и мозгового (МВ) вещества при кормлении ЦТ

Изменение содержания БА в тимусе сопровождается сдвигом в тучно–клеточной популяции. Уже через 2 недели приема трепела намечается тенденция к увеличению количества тучных клеток, максимальное увеличение наблюдается через 3 недели кормления ЦТ, в основном за счет частично или полностью дегранулированных Т-2 и Т-3 форм (рис.3), затем число тучных клеток несколько уменьшается.

Рис.3. Распределение различных форм тучных клеток по степени дегрануляции в тимусе интактных крыс (А) и через 3 недели кормления ЦТ (В)

Как известно, тучные клетки многофункциональны и являются активными участниками иммунных процессов (Бережная Н.М., Сепиашвили Р.И., 2003). В связи с этим увеличение их числа и изменение функциональной активности в виде дегрануляции в эксперименте свидетельствует об активации протекания иммунных реакций.

Мы предполагаем, что резкое снижение уровней биоаминов в структурах тимуса через 4 недели приема ЦТ может быть обусловлено несколькими причинами: повышенной инактивацией биогенных аминов путем их связывания с гликозаминогликанами и гепарином (выброс гепарина при дегрануляции тучных клеток) (Быков В.Л., 1999); повышением количества и активности субкапсулярных клеток, часть из которых рассматриваются как поглотители биоаминов (Гордон Д.С. и др., 1982; Сергеева В.Е. и др.,1992), а может быть и активацией ферментов (моноаминооксидазы, катехоламин-о-метил-трансферазы, гистаминазы, диаминооксидазы), инактивирующих биогенные амины.

На наш взгляд, такое изменение уровня биоаминов в структурах тимуса на этом сроке необходимо для предотвращения аутоиммунных и аллергических реакций и является защитной мерой при активации системы иммунитета.

Анализ изменения уровня серотонина в лимфоцитах периферической крови показал постепенное его снижение, причем через 4 недели приема ЦТ его количество снижается более чем в 2 раза по сравнению с интактной группой. Поскольку известно, что серотонинергическая система активирует супрессорную активность, влияя на численность Т-супрессоров, уменьшая выработку IgM и IgG В-лимфоцитами, активируя миграцию супрессоров в костный мозг, а также контролируя скорость пролиферации иммунокомпетентных клеток (Девойно Л.В. и др., 1983), то можно полагать, что снижение этого биоамина в лимфоцитах будет способствовать иммунопролиферативным процессам.

Концентрация СТ и КА в полиморфноядерных лейкоцитах имеет тенденцию к снижению. Уровень ГСТ изменяется волнообразно. Значение соотношения (СТ+ГСТ)/КА через 4 недели приема трепела достоверно ниже нормы и составляет 2,35 (в норме 3,34), что говорит об усилении функциональной активности этих клеток (Стручко Г.Ю., 2003). Вероятно, это выражается в синтезе большого количества лизосомальных ферментов, используемых для переваривания фагоцитируемого материала. Изменение со стороны фагоцитарной активности клеток крови также подтверждает это.

Наиболее значимые изменения в анализах крови наблюдаются со стороны лейкоцитарного ростка. Количество лейкоцитов нарастает за счет увеличения абсолютного содержания лимфоцитов до 3-недельного срока приема ЦТ, затем их процентное содержание несколько снижается, а количество нейтрофилов растет. Наблюдаемое увеличение числа лейкоцитов периферической крови может быть связано с увеличением содержания КА в плазме, которые способны стимулировать клеточный цикл, усиливать синтез прекурсоров гемопоэза и увеличивать выход зрелых клеток костного мозга в периферическую кровь (Maestroni G.I.M., 1991).

Наблюдается тенденция к снижению количества эритроцитов и уровня Hb. Через 4 недели приема ЦТ количество эритроцитов стало ниже нормы в 1,3 раза. Показатель Hb составил 76% от нормы. Вероятно, это связано с выраженным энтеросорбционным действием ЦТ, благодаря которому происходит снижение всасывания железа из кишечника.

Из показателей иммунограммы следует отметить волнообразные изменения концентрации IgA (увеличение через 2 и 4 недели), а также значительное возрастание уровня IgG через 4 недели (рис.4), что отражает повышение функциональной активности В-клеток и позволяет судить об усилении гуморальных факторов защиты под действием трепела.

Рис.4. Иммуноглобулины крови (г/л) крыс в норме и при приеме ЦТ

Для оценки степени взаимозависимости и взаимообусловленности процессов, происходящих в тимусе и в крови при приеме ЦТ, были проанализированы 92 линейные корреляционные пары с изученными показателями. Установлено, что максимальное количество слабых корреляционных взаимосвязей наблюдалось через 2 недели приема ЦТ, минимальное – через 4 недели. Число пар с сильной корреляцией увеличилось к 4-й неделе приема ЦТ более чем в 2 раза. Поскольку из 92 проанализированных связей 79 пар с участием биогенных аминов, то усиление корреляционных связей при приеме ЦТ свидетельствует о напряжении медиаторных взаимодействий, а также о наличии их регуляторной функции в процессах иммунокоррекции. Биогенные амины, а также продуцирующие и накапливающие их структуры тимуса и крови образуют своеобразную буферную систему, которая включается при любых изменениях тканевого гомеостаза и регулирует активность иммунных реакций в соответствии с физиологическими потребностями организма.

Таким образом, на основании изученного материала можно сделать вывод, что ЦТ имеет определенный иммуномодулирующий эффект в эксперименте на лабораторных животных. Однако необходимо отметить и некоторые отрицательные моменты при приеме ЦТ в течение 4 недель – это снижение уровня Hb и количества эритроцитов.

ВЫВОДЫ

1. Прием ЦТ приводит к увеличению ширины коркового, диаметра и площади мозгового вещества долек, росту количества и величины люминесцирующих гранулярных клеток субкапсулярной и кортикомедуллярной зон.

2. Морфологические изменения в тимусе после приема ЦТ сопровождаются изменениями функционального состояния его биоаминсодержащих структур:

а) во всех изучаемых структурах тимуса значительно уменьшается уровень гистамина;

б) в премедуллярных и субкапсулярных клетках регистрируется увеличение содержания катехоламинов с максимальным повышением через 3 недели кормления ЦТ;

в) через 4 недели приема ЦТ уровень всех биоаминов в биоаминсодержащих структурах тимуса резко уменьшается.

3. Кормление ЦТ сопровождается нарастанием числа тучных клеток со значительным увеличением количества дегранулированных Т-2 и Т-3 форм через 3 и 4 недели.

4. Прием ЦТ приводит к изменению содержания биогенных аминов в клеточных элементах и плазме крови:

а) в лимфоцитах через 2 недели кормления ЦТ наблюдается увеличение уровня гистамина и снижение содержания серотонина;

б) в плазме крови уровень катехоламинов, серотонина и гистамина постепенно увеличивается до 3-недельного срока с дальнейшим значительным снижением через 4 недели.

5. При приеме ЦТ соотношение (серотонин+гистамин)/катехоламины во всех изучаемых структурах тимуса ниже значения у интактных крыс на всех сроках кормления; в полиморфноядерных лейкоцитах соотношение (ГСТ+СТ)/КА также уменьшается, с достижением минимального значения через 4 недели кормления ЦТ.

6. Кормление ЦТ сопровождается изменениями показателей крови:

а) возрастает количество лейкоцитов за счет увеличения абсолютного содержания лимфоцитов на всех сроках кормления ЦТ;

б) наблюдается увеличение уровней IgG и IgA через 2 и 4 недели приема ЦТ;

в) уровень базального и стимулированного фагоцитоза постепенно нарастает;

г) снижается количество эритроцитов и уровень Hb.

7. Минимальная корреляционная зависимость в корреляционных парах наблюдается через 2 недели кормления ЦТ, затем сила корреляционных взаимодействий постепенно увеличивается с достижением наибольшего количества сильных корреляционных связей через 4 недели.

8. Изменения уровня биогенных аминов, морфологической характеристики тимуса и показателей крови свидетельствуют об иммуномодулирующем действии ЦТ, особенно выраженном при 3-недельном приеме.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ

ДИССЕРТАЦИИ:

1. Морфофункциональное состояние структур тимуса, надпочечников и периферической крови крыс через неделю после спленэктомии / Меркулова Л.М., Стручко Г.Ю., Стоменская И.С., Агафонкина Т.В. Вестн. Чуваш. ун-та. – Чебоксары, 2001. – №4. – С. 95-104.

2. Изучение иммунобиохимических и гематологических параметров крови после применения цеолитсодержащего трепела / Агафонкина Т.В., Меркулова Л.М., Стручко Г.Ю., Мухаммад Захид. Материалы IV Междунар. конф. по функциональной нейроморфологии “Колосовские чтения - 2002”. – СПб., 2002. – С. 39-40.

3. Использование математического моделирования для оценки функционирования иммунной системы / Стручко Г.Ю., Меркулова Л.М., Агафонкина Т.В., Стоменская И.С. Математические модели и их приложения: Сб. ст. – Чебоксары, 2002. – С. 133-138.

4. Возможности математических методов исследования в оценке функционального состояния эндокринных желез / Меркулова Л.М., Стоменская И.С., Стручко Г.Ю., Агафонкина Т.В. Математические модели и их приложения: Сб. ст. – Чебоксары, 2003. – С. 124-128.

5. Агафонкина Т.В. Возможности статистического анализа в оценке содержания биогенных аминов в структурах тимуса при приеме цеолитсодержащего трепела // Математические модели и их приложения: Сб. ст. Чебоксары, 2004. – С. 165-169.

6. Идентификация люминесцирующих гранулярных клеток тимуса в норме и в условиях иммуносупрессии / Меркулова Л.М., Стручко Г.Ю., Мухаммад Захид, Агафонкина Т.В. Морфологические ведомости (приложение): Материалы V Общерос. съезда анатомов, гистологов и эмбриологов. – Москва–Берлин, 2004. – №1-2. – С. 101.

7. Стручко Г.Ю., Агафонкина Т.В., Меркулова Л.М. Исследование структур тимуса и иммунобиохимических показателей крови после применения полиоксидония и цеолитсодержащего трепела // Вестн. Чуваш. ун-та. – Чебоксары, 2004. – №2. – С. 66-76.

8. Морфофункциональное исследование структур тимуса после введения полиоксидония / Мухаммад Захид, Меркулова Л.М., Стручко Г.Ю., Агафонкина Т.В., Михайлова М.Н., Стоменская И.С. Материалы I съезда физиологов СНГ, Дагомыс, 2005. – Т. 2. – С. 117.

9. Стоменская И.С., Меркулова Л.М., Стручко Г.Ю., Шумилова Е.Б., Агафонкина Т.В., Люминесцирующие гранулярные клетки кожи и надпочечников в условиях вторичного иммунодефицита // Морфология. – 2006. – №4 – С.119.

10. Агафонкина Т.В., Меркулова Л.М., Стручко Г.Ю. Использование корреляционного анализа при оценке функционирования иммунной системы // Математические модели и их приложения: Сб. ст. – Чебоксары, 2006. – С. 156-162.

11. Агафонкина Т.В., Меркулова Л.М., Стручко Г.Ю. Исследование структур тимуса и показателей крови крыс при кормлении цеолитсодержащим трепелом // Вестн. Чуваш. ун-та. – Чебоксары, 2006. – №2. – С.46-56.



 


Похожие работы:

«ПЕСТОВ АРТУР ЮРЬЕВИЧ ЗАКОНОМЕРНОСТИ ВЗАИМООТНОШЕНИЙ БИОЦЕНОЗА И ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ ПРИ КАРИЕСЕ 03.02.03 – Микробиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Волгоград 2012 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Волгоградский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации. Научный...»

«Новикова Ирина Александровна КОРРЕКЦИЯБИОХИМИЧЕСКОГО СТАТУСА У ВЫСОКОПРОДУКТИВНЫХ КОРОВ ПРИ КЕТОЗАХ В УСЛОВИЯХ ПРОМЫШЛЕННОГО КОМПЛЕКСА 03.01.04 – биохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Курск – 2013 Диссертационная работа выполнена в ФГБОУ ВПО Орловский государственный аграрный университет. Научный руководитель: доктор биологических наук, доцент Ярован Наталья Ивановна Официальные оппоненты:

«Шамова Ольга Валерьевна Молекулярно - клеточные основы реализации биологической активности антимикробных пептидов лейкоцитов 14.03.03 – патологическая физиология 03.01.04 – биохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Санкт-Петербург 2013 Работа выполнена в Отделе общей патологии и патофизиологии Федерального государственного бюджетного учреждения Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины Северо-Западного отделения...»

«Потапов Василий Дмитриевич РАЗРАБОТКА И ПРИМЕНЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ МОДЕЛЕЙ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ХРОНИЧЕСКОЙ ТУБЕРКУЛЕЗНОЙ ИНФЕКЦИИ 03.02.03 – микробиология 03.01.06 – Биотехнология (в том числе бионанотехнологии) Автореферат диссертации на соискание учёной степени доктора биологических наук Оболенск – 2013 Работа выполнена в Федеральном бюджетном учреждении науки Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав...»

«Павлов Виталий Михайлович Методология и результаты молекулярно-генетического изучения вакцинного штамма Francisella tularensis 03.02.03– микробиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук Оболенск – 2011 Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении науки Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. НАУЧНЫЙ...»

«Жиренкина Екатерина Николаевна Особенности очага висцерального лейшманиоза в Папском районе Наманганской области Узбекистана 03.02.11 – паразитология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Москва – 2013 Работа выполнена в ГБОУ ВПО Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации Научный руководитель: доктор биологических наук, профессор Понировский Евгений...»

«Лапин Александр Александрович ИЗУЧЕНИЕ МОЛЕКУЛЯРНО-БИОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ВАРИАНТОВ ВАКЦИННОГО ШТАММА FRANCISELLA TULARENSIS С ДЕЛЕТИРОВАННЫМИ ГЕНАМИ СИСТЕМЫ РЕКОМБИНАЦИИ RECA И RECD 03.02.03 – микробиология 03.01.03 – молекулярная биология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Оболенск – 2011 Работа выполнена в Федеральном бюджетном учреждении науки Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии...»

«Жадченко Юлия Викторовна Распространенность стафилококков в популяции лиц, живущих в крупном промышленном городе 03.02.03 – Микробиология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Волгоград 2013 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Волгоградский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации Научный руководитель: доктор...»

«Неверов Алексей Дмитриевич КОМПЬЮТЕРНЫЙ АНАЛИЗ СПЛАЙСИНГА 03.00.03 - Молекулярная биология АВТОРЕФЕРАТ Диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук - Москва 2007 – Работа выполнена в лаборатории биоинформатики Государственного научно-исследовательского института генетики и селекции промышленных микроорганизмов ФГУП “ГосНИИ генетика”. Научный руководитель : доктор биологических наук, кандидат физико-математических наук Миронов Андрей Александрович...»

«Сабарайкина Светлана Михайловна ЭКОЛОГО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ НЕКОТОРЫХ ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ КРАСНЫХ СМОРОДИН ПОДРОДА RIBESIA L. В УСЛОВИЯХ ЯКУТИИ 03.00.05 – ботаника 03.00.16 – экология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Саратов – 2009 Работа выполнена в филиале Ботанический сад Института биологических проблем криолитозоны СО РАН. Научные руководители: доктор сельскохозяйственных наук, профессор Сорокопудов Владимир Николаевич кандидат...»

«Золотарева Наталья Владимировна Регуляция каталитической активности алкогольдегидрогеназы фармакологическими препаратами Пирацетам, Зорекс и Унитиол 03.01.04 – биохимия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Тверь – 2011 Работа выполнена на кафедре физико-химической экспертизы биоорганических соединений Тверского государственного университета Научный руководитель доктор химических наук, профессор Лапина Галина Петровна

«Суфияров Ринат Сабитович КОМПЛЕКСНАЯ ПРОФИЛАКТИКА, ДИАГНОСТИКА И ХИРУРГИЧЕСКОЕ ЛЕЧЕНИЕ АССОЦИИРОВАННЫХ ГНОЙНО- ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ 14.01.17. – ХИРУРГИЯ 03.02.03- микробиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук УФА – 2011 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Башкирский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения и социального...»

«киршева надежда алексеевна СТРУКТУРА ЛИПОПОЛИСАХАРИДОВ И ИЗБИРАТЕЛЬНАЯ ВИРУЛЕНТНОСТЬ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ФОТОРАБДОЗА 03.02.03 – микробиология 03.01.04 – биохимия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Оболенск – 2013 Работа выполнена в Федеральном бюджетном учреждении науки...»

«ЕЛИСТРАТОВА Людмила Леонтьевна КЛИНИКО-МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ АКНЕПОДОБНЫХ ДЕРМАТОЗОВ, ОСЛОЖНЕННЫХ ДЕМОДЕКОЗОМ 03.02.03 – Микробиология 14.01.10 – Кожные и венерические болезни АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук Санкт-Петербург 2013 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Ульяновский государственный университет Министерства здравоохранения...»

«Богун Александр Геннадьевич Использование молекулярно-генетических методов для комплексного анализа штаммов Mycobacterium tuberculosis 03.02.03 – Микробиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Оболенск 2010 г. Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении науки Государственный научный центр прикладной...»

«МИХАЙЛОВА ЛЮДМИЛА ВИКТОРОВНА БИОЛОГИЯ УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ, ВЫЗЫВАЮЩИХ КИШЕЧНЫЕ ИНФЕКЦИИ 03.02.03 – Микробиология АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских...»

«АГЕЕВ Сергей Андреевич КОНСТРУИРОВАНИЕ АТТЕНУИРОВАННЫХ ШТАММОВ YERSINIA  PESTIS С ПОНИЖЕННОЙ РЕАКТОГЕННОСТЬЮ 03.02.03– микробиология 03.01.06 – биотехнология (в том числе бионанотехнологии) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук Оболенск – 2010 Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении науки Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав...»

«НОВЫЕ ПОСТУПЛЕНИЯ В БИБЛИОТЕКУ Авторефераты Январь-2013 1. Аббасова, Самира Фуад кызы. Возможности видеоэндоскопического хирургического лечения хронического калькулезного холецистита у лиц пожилого возраста : автореферат диссертации. кандидата медицинских наук : 14.01.17 / С. Ф. Аббасова ; Российский университет дружбы народов (М.), кафедра госпитальной хирургии. - М. : б. и., 2013. - 19 с. Экземпляры: всего:1 - анл(1). 2.

«Шрамко Павел Александрович РАЗРАБОТКА МОДЕЛИ ХРОНИЧЕСКОЙ ТУБЕРКУЛЕЗНОЙ ИНФЕКЦИИ И ЕЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ДЛЯ ОТБОРА ПЕРСПЕКТИВНЫХ ВАКЦИННЫХ ШТАММОВ MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS Специальности: 03.02.03 – микробиология 03.01.06 – биотехнология (в том числе бионанотехнологии) АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук ОБОЛЕНСК-2012 Работа выполнена в лаборатории аэробиологических испытаний Федерального бюджетного учреждения науки Государственный...»

«ШУКЛИНА ЕВГЕНИЯ ВАСИЛЬЕВНА ОСОБЕННОСТИ ЭПИЗООТОЛОГИИ И СИСТЕМА ЛЕЧЕБНО – ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ МЕРОПРИЯТИЙ ПРИ АССОЦИАТИВНОЙ ИНВАЗИИ МАРАЛОВ 03.00.19 – паразитология Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук Барнаул 2007 Работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте пантового оленеводства Сибирского отделения Российской академии сельскохозяйственных наук Научный руководитель: доктор ветеринарных наук, профессор,...»







Загрузка...



 
2014 www.avtoreferat.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты диссертаций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.