WWW.DISS.SELUK.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА
(Авторефераты, диссертации, методички, учебные программы, монографии)

 


Синтез и изучение гипогликемической активности производных 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот

На правах рукописи

КРАСНОВА АНАСТАСИЯ ИВАНОВНА

Синтез и Изучение гипогликемической

активности производных

4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот

14.04.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозия

АВТОРЕФЕРАТ

диссертации на соискание ученой степени

кандидата фармацевтических наук

ПЕРМЬ - 2011

Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (г. Пермь)

Научный руководитель: доктор фармацевтических наук, доцент

Пулина Наталья Алексеевна

Научный консультант: доктор медицинских наук, профессор

Юшкова Татьяна Александровна

Официальные оппоненты: доктор фармацевтических наук, профессор

Михайловский Александр Георгиевич

ГБОУ ВПО «Пермская государственная фармацев-тическая академия» Минздравсоцразвития России

доктор медицинских наук, профессор

Ларионов Леонид Петрович

ГБОУ ВПО «Уральская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России

Ведущая организация: ГБОУ ВПО «Пятигорская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации

Защита состоится « 18 » октября 2011 г. в 13.00 часов на заседании диссертационного совета Д 208.068.01 при ГБОУ ВПО ПГФА Минздравсоцразвития России по адресу: 614990, г. Пермь, ул. Полевая, 2.

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке ГБОУ ВПО ПГФА Минздравсоцразвития России по адресу: г. Пермь, ул. Крупской, 46.

Дата размещения объявления о защите диссертации на сайте Министерства образования и науки Российской Федерации http://www.mon.gov.ru «15» сентября 2011 г. и на сайте ПГФА http://pfa.ru «14» сентября 2011 г.

Автореферат разослан «15» сентября 2011 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета Д 208.068.01,

кандидат фармацевтических наук, доцент И.А. Липатникова

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность темы. За последние 30–40 лет в мире отмечается значительный подъем заболеваемости сахарным диабетом (СД), что проявляется возрастанием в 2 раза числа больных каждые 12-15 лет. Многофакторность генеза СД приводит к тому, что проводимая фармакотерапия данного социально значимого заболевания не всегда обеспечивает достижение целевого эффекта и стойкой компенсации. Определенную проблему в лечении СД составляют осложнения, и не всегда лекарственная терапия обеспечивает снижение риска развития микро- и макроангиопатий, что служит основной причиной высокой летальности и инвалидизации. В связи с этим, поиск новых высокоэффективных антидиабетических препаратов, обеспечивающих целевые терапевтические и профилактические эффекты, весьма актуален. Одним из перспективных научных направлений в этой области является синтез и изучение новых органичес-ких соединений.

Среди продуктов химического синтеза особый интерес представляют металлокомплексы, в частности соединения Zn2+ и V4+, ввиду их способности участвовать в обмене углеводов и потенцировать действие инсулина. Так, высокая сахароснижающая активность выявлена среди комплексных соединений V4+ с производными мальтола, яблочной кислоты, пиколинатов, бигуанидов, изоникотиновой кислоты, ряда аминокислот и др. Однако, мало работ посвящено его взаимодействию с -дикетонами.

Определенными преимуществами в реакциях комплексообразования обладают органические лиганды, являющиеся естественными метаболитами организма, в связи с их малой токсичностью и повышением биодоступности металлокомплексов на их основе. К ним можно отнести производные 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых (ароилпировиноградных) кислот (АрПК), обладающие широким спектром биологической активности, в частности, антимикробным, противовоспалительным, анальгетическим, жаропонижающим, антигипоксическим и др. действием. Недавно начатые исследования в Пермской государственной фармацевтической академии по изучению гипогликемической активности гетариламидов АрПК и некоторых продуктов их химических превращений показали целесообразность дальнейшего расширения фармакологического скрининга в ряду других производных АрПК, особенно в ряду бутеноатов гетариламмония и металлокомплексных соединений. При этом реакции эфиров, арил-, гетариламидов АрПК с ванадила сульфатом ранее не изучены.

Таким образом, изучение гипогликемического действия производных АрПК и целенаправленный синтез новых комплексных соединений ванадия (IV) на их основе с последующим многофакторным исследованием фармакологических эффектов наиболее активных веществ является актуальным.

Цель работы. Целью настоящего исследования является синтез и поиск высокоэффективных гипогликемических веществ в ряду производных 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот с комплексным влиянием на различные звенья патогенеза СД и его осложнений.

Задачи исследования. Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:

  1. Осуществить синтез и изучить особенности строения оксованадиевых комплексов на основе метиловых эфиров, ариламидов и гетариламидов 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот.
  2. Изучить острую токсичность, провести скрининг гипогликемической активности 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеноатов гетариламмония, метиловых эфиров, ариламидов, гетариламидов АрПК и их металлокомплексов.
  3. Установить определенные зависимости «структура - гипогликемическая активность» в синтезированных рядах соединений.
  4. Изучить с позиций современной диабетологии влияние перспективных веществ на центральную нервную и иммунную систему в сравнении с эталонными препаратами и выявить наиболее активное соединение для дальнейших фармакологических исследований.

Научная новизна. Установлено, что в реакции метиловых эфиров, ариламидов, гетариламидов 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот с ванадила сульфатом образуются соответствующие оксованадиевые металлокомплексы. Подтверждено, что исходные реагенты координируются металлом как бидентатные O-O лиганды.





Впервые проведен скрининг гипогликемической активности 56 ранее описанных и 28 новых производных АрПК, определена их низкая токсичность и установлена зависимость «структура-активность» в соответствующих рядах соединений. Выявлено и охарактеризовано комплексное влияние на некоторые звенья патогенеза сахарного диабета и его осложнений, в частности, на индивидуальное поведение и память экспериментальных животных, анальгетические и антигипоксические свойства у двух 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеноатов гетариламмония и семи металлокомплексов на основе производных АрПК, при этом наибольший положительный эффект отмечен у четырех металлокомплексов цинка и ванадия, а также у 2-гидрокси-4-оксо-4-фенил-2-бутеноата 2-бензо-тиазолиламмония. Для сравнительной характеристики эти эффекты были исследованы в эксперименте у эталонного гипогликемического препарата – метформина. С позиций современной диабетологии изучено иммунофармакологическое действие наиболее активного оксованадиевого металлокомплекса.

Научная новизна работы подтверждена 1 патентом и 1 решением о выдаче патента РФ на изобретение.

Практическая значимость. В ходе исследования разработаны или усовершенствованы удобные методы синтеза бис(3-арил-1-метоксикарбонил-1,3-пропандионато)оксованадия, бис[3-арил-1-(4-метилфенил)-карбоксамидо-1,3-пропандионато]оксованадия, бис{3-арил-1-[2(3)-гетарил]карбоксамидо-1,3-про-пандионато}оксованадия и 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеноатов гетариламмония, которые просты по выполнению и могут быть использованы как препаративные при получении новых биологически активных веществ. В процессе работы синтезировано 84 соединения, из них 28 неописанных в литературе.

Оценены фармако-токсикологические свойства 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеноатов гетариламмония, метиловых эфиров, ариламидов и гетариламидов 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот и их металлокомплексов. Выявлены некоторые закономерности проявления гипогликемической, антигипоксической активности, а также влияния на ЦНС от химической структуры изученных соединений, которые могут быть использованы в целенаправленном синтезе и поиске антидиабетических средств среди производных 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот.

Установлено, что по выраженности гипогликемических, антигипоксических и анальгетических свойств, восстановления индивидуального поведения и памятного следа у экспериментальных животных наиболее активным является бис[3-(4-хлорфенил)-1-(4-метилфенил)карбоксамидо-1,3-пропандионато]оксо-ванадий. Выявленные эффекты определяют перспективность дальнейших фармакологических исследований данного вещества в качестве потенциального средства для лечения сахарного диабета и его осложнений.

Результаты научных исследований внедрены в научно-исследовательский процесс кафедры фармацевтической химии о/ф ГБОУ ВПО ПГФА Минздравсоцразвития России и кафедры фармакологии ГБОУ ВПО ПГМА им. ак. Е.А. Вагнера Минздравсоцразвития России.

Апробация работы. Результаты работы доложены на итоговых научных конференциях профессорско-преподавательского состава ГБОУ ВПО ПГФА Минздравсоцразвития России в 2008-2010 гг., Российской конференции «Фармакология и токсикология фосфорорганических соединений и других биологически активных веществ» (Казань, 2008), Китайско-Российской научной конференции по фармакологии (Харбин, 2008), региональной научной конференции «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск, 2009), XVI Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2009), региональной научно-практической молодежной школе-конференции «Химия поликарбонильных соединений» (Пермь, 2009), на межвузовской научной конференции студентов и молодых ученых «Фармация в XXI веке: эстафета поколений" (Санкт-Петербург, 2009), на VIII конференции иммунологов Урала «Актуальные вопросы фундаментальной, клинической иммунологии и аллергологии» (Сыктывкар, 2010), на конкурсе-конференции по органической химии для молодых ученых ИОС УрО РАН, УГТУ-УПИ и УрГУ (Екатеринбург, 2010), на международном симпозиуме «Advanced science in organic chemistry» (Крым, 2010).

Публикации. Основное содержание работы представлено в 19 публикациях, из них: 4 статьи в изданиях, рекомендуемых ВАК, получен 1 патент и 1 решение о выдаче патента РФ на изобретение.

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-иссле-довательских работ ГБОУ ВПО ПГФА Минздравсоцразвития России (№ государственной регистрации 01.9.50.007419).

Конкретное участие автора в получении научных результатов. Изучены и обобщены литературные данные о направлениях поиска новых веществ с антидиабетической активностью. Автором осуществлен синтез 84 соединений, из них 28 неописанных в литературе. Разработан метод получения бис(3-арил-1-метоксикарбонил-1,3-пропандионато)оксованадия, бис{3-арил-1-арил[2(3)-гета-рил]карбоксамидо-1,3-пропандионато}оксованадия, усовершенствован синтез 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеноатов гетариламмония. Осуществлена интерпретация полученных данных ИК-, ЯМР1Н-спектроскопии, атомно-абсорбционного анализа, масс-спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой для подтверждения структуры соединений. Автором проведен скрининг гипогликемического действия полученных веществ, выявлены некоторые закономерности взаимосвязи «структура-активность» и изучено влияние наиболее перспективных соединений на центральную нервную и иммунную системы.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 151 странице машинописного текста, содержит введение, обзор литературы, две главы результатов собственных исследований, экспериментальную часть, выводы, практические рекомендации по использованию результатов, приложение. Список литературы содержит 135 отечественных и 133 зарубежных источников. Иллюстрации представлены 19 таблицами и 17 рисунками.

Основные положения выносимые на защиту:

  1. Синтез и строение новых оксованадиевых комплексов метиловых эфиров, ариламидов, гетариламидов 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот.
  2. Характеристика острой токсичности и гипогликемической активности 84 производных АрПК и установленные взаимосвязи «структура-активность» в синтезированных рядах соединений.
  3. Характеристика влияния 9 наиболее активных соединений на центральную нервную и иммунную системы с позиций современной диабетологии.
  4. Выбор бис[3-(4-хлорфенил)-1-(4-метилфенил)карбоксамидо-1,3-пропан-дионато]оксованадия, который является малотоксичным веществом, обладает выраженным гипогликемическим и антигипоксическим действием, восстанавливает индивидуальное поведение и память, а также проявляет иммунофармакологические свойства у здоровых животных и крыс с экспериментальным сахарным диабетом, в качестве перспективного соединения для дальнейших фармакологических исследований.

ОСНОВНОЕ СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Глава 1. Перспективы поиска новых гипогликемических средств среди продуктов органического синтеза (обзор литературы).

Глава 2. Поиск химических соединений с гипогликемическим действием и их направленный синтез в ряду производных АрПК

2.1. Синтез производных 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот и скрининг их гипогликемической активности с оценкой острой токсичности

Проведенный литературный поиск показал отсутствие систематического изучения гипогликемической активности производных АрПК. Учитывая актуальность поиска новых эффективных и безопасных антидиабетических препаратов, представляло интерес впервые провести скрининг гипогликемической активности среди метиловых эфиров 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот (3а-г), 4-метилфениламидов 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот (4а-г), гетариламидов 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот (5а-я), 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеноатов гетариламмония (6а-п), бис{3-арил-1-[2(3)-гетарил]карбоксамидо-1,3-пропандионато}цинка (7а,б), бис[3-арил-1-(2-гетарил)карбоксамидо-1,3-пропандионато]кадмия (7в,г).





Соединения 3-7 были получены и описаны ранее, однако для проведения фармакологических исследований автором воспроизведен синтез указанных веществ по известным методикам согласно нижеприведенной схемы. Для синтеза 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот (1) использована реакция конденсации Клайзена, а 5-арилфуран-2,3-дионы (2) получали циклизацией АрПК 1 с тионилхлоридом.

1,2,3,4: R=H (а), Сl (б), СН3 (в), СН3О (г);

5: Ht=2-С5Н4N (2-пиридил), R=H (а), Сl (б), СН3 (в), СН3О (г); Ht=3-С5Н4N (3-пири-дил), R=H (д), Сl (е), СН3(ж), СН3О (з); Ht=С3Н4NS (2-тиазолинил), R=H (и), Сl (к), СН3 (л), СН3О (м); Ht=С2Н1N2S [2-(1,3,4-тиадиазолил)], R=H (н), Сl (о), СН3 (п), СН3О (р); Ht=С3Н3N2S [2-(5-метил-1,3,4-тиадиазолил)], R=H (с), Сl (т), СН3 (у), СН3О (ф); Ht=С4Н5N2S [2-(5-этил-1,3,4-тиадиазолил)], R=H (х), Сl (ц), СН3 (ч), СН3О (ш); Ht=С7Н3СlNO [2-(5-хлоризоксазолил)], R=H (щ), СН3 (ы); Ht=С7Н4NS (2-бензо-тиазолил), R=H (э), СН3 (ю), СН3О (я);

6: Ht=С3Н4NS, R=H (а), Сl (б), СН3 (в), СН3О (г); Ht=С2Н1N2S, R=H (д), Ht=С3Н3N2S, R=H (е), СН3О (ж); Ht=С4Н5N2S, R=СН3 (з); Ht=С2Н1N2S2 [2-(5-меркапто-1,3,4-тиа-диазолил)],R=Сl (и); Ht=С7Н5N2 (2-бензимидазолил), R=H (к); Ht=С7Н3СlNO, R=СН3 (л); Ht=С7Н4NS, R=H (м), Сl (н), СН3 (о), СН3О (п);

7: Ме=Zn2+, Ht=С5Н3BrN [2-(5-бромпиридил)], R=Cl (а); Ht=3-С5Н4N, R=Н (б); Ме=Сd2+, Ht=2-С5Н4N, R=H (в); Ht=С7Н5N2, R=Н (г).

Спектральные и физико-химические характеристики полученных производных АрПК 3-7 соответствовали литературным данным.

Изучение острой токсичности производных АрПК 3-7 по методу Г.Н. Першина на белых нелинейных мышах обоего пола при пероральном введении в виде взвеси в 2% крахмальном растворе из расчета 0,1 мл/10г показало, что исследуемые вещества 3а-г,4а-г,5а-з,7б,7в с установленной среднесмертельной дозой (DL50) относятся к 4 классу опасности согласно ГОСТу Р 53856-2010, а бутеноаты и - к 5 классу опасности. Соединения 5и-я,6а,б,г-л,6н-п,7а,7г также могут быть отнесены к 4 классу опасности до проведения дальнейших токсикологических исследований.

Фармакологический скрининг гипогликемической активности осуществляли на белых нелинейных крысах обоего пола в условиях модели аллоксанового диабета. Экспериментальную гипергликемию моделировали внутрибрюшинным введением аллоксана тригидрата в дозе 170 мг/кг. Исследуемые производные 3-7, а также субстанцию препарата сравнения метформина вводили перорально в дозе 50 мг/кг в виде взвеси в 2% крахмальном растворе. Контрольным животным вводили эквиобъемное количество 2% крахмального раствора. Концентрацию глюкозы в крови животных определяли глюкозооксидазным методом до введения соединений, а также через 30 и 120 минут после него.

Установлено, что из 56 производных АрПК 36 веществ проявляют гипогликемическое действие различной степени выраженности. При этом пять сое-динений превосходят по эффективности метформин, из них четыре вещества ,7а,7б,7в - в 1,2-1,5 раза на протяжении всего эксперимента, а бутеноат – в 1,2 раза на 2-м часе, действуя на 30 минутах опыта наравне с препаратом сравнения. Бутеноат проявляет эффект на уровне эталона во все сроки наб-людения, а действие соединений 6д,6и, сопоставимо с активностью эталона только на 2-м часе опыта. У двадцати семи веществ (3в,4г,-в,5д-и,-н,5р-т, 5ф,5х,5ш,5ы,5э,6б,6ж,6з,6л,,) гипогликемический эффект уступает активности метформина в 1,3-4,3 раза.

Сравнительный анализ показал, что частота выявления гипогликемического эффекта среди метиловых эфиров 3 и 4-метилфениламидов АрПК 4 составляет 25%, для ряда гетариламидов АрПК 5 – 66%, среди бутеноатов гетариламмония 6 - 73%, а для ряда металлокомплексных соединений на основе гетариламидов – 77% (рис. 1).

Рис. 1. Частота выявления гипогликемической активности среди производных АрПК.

При изучении взаимосвязи «структура - гипогликемическая активность» установлено, что эффект зависит от наличия и характера заместителей при С1, а также в пара-положении арильного фрагмента молекулы производных АрПК.

Выявлено, что наличие в структуре производных АрПК сложноэфирного или ариламидного фрагмента (соединений 3,4) не приводит к появлению значимого гипогликемического эффекта. В свою очередь, введение гетариламидного фрагмента в структуру молекулы АрПК, в большинстве случаев, способствует усилению специфической активности. Так, эффектом средней степени выраженности обладают соединения ряда 2(3)-пиридиламидов АрПК 5а-з, при этом введение электроноакцепторного заместителя в арильный радикал приводит к усилению гипогликемических свойств у веществ 5б,5е. Для ряда производных 2-(5-R-1,3,4-тиадиазолил)амидов АрПК 5 н-ш, напротив, введение в арильный фрагмент любого заместителя, а в большей степени, электроноакцепторного характера, приводит к уменьшению гипогликемической активности. Эта же закономерность характерна для 2-тиазолиниламидов 5и-м и 2-бензо-тиазолиламидов 5э-я. Отмечено, что переход от гетариламидов АрПК 5 к соответствующим бутеноатам 6, как правило, сохраняет гипогликемический эффект или приводит к усилению действия. Кроме того, у гетариламмониевых солей, содержащих в составе 5-R-1,3,4-тиадиазол (веществ 6д-и) или бензотиазол (сое-динений 6м-п), аналогично производным АрПК 5, гипогликемический эффект наиболее выражен у веществ 6д,6е,6м без заместителя в арильном фрагменте. Хелаты 7 проявляют выраженные сахароснижающие свойства, значительно превосходящие действие исходных лигандов, что свидетельствует о потенцировании эффекта при комплексообразовании.

Среди изученных рядов производных АрПК по критериям эффективности и безопасности нами выявлено пять наиболее активных малотоксичных соединений, гипогликемический эффект которых превосходит или равен активности метформина во все сроки наблюдения (рис. 2). В эту группу вошли цинковые и кадмиевый хелаты на основе 2(3)-(5-R)-пиридиламидов АрПК 7а,7б,, а также 2-гидрокси-4-оксо-4-фенил-2-бутеноат 2-[5-метил-(1,3,4-тиадиазолил)]аммония () и 2-гидрокси-4-оксо-4-фенил-2-бутеноат 2-бензотиазолиламмония ().

Рис. 2. Сравнительная характеристика гипогликемического действия наиболее актив-ных производных АрПК и метформина.

На основании проведенных исследований показана перспективность дальнейшего изучения класса производных АрПК, в частности бутеноатов гетариламмония 6 и металлокомплексных соединений 7, с целью создания новых высокоэффективных гипогликемических средств.

2.2. Синтез, строение и оценка гипогликемической активности оксованадиевых комплексов на основе производных АрПК

2.2.1. Синтез и строение бис(3-арил-1-метоксикарбонил-1,3-пропандио-нато)оксованадия, бис{3-арил-1-арил[2(3)-гетарил]карбоксамидо-1,3-пропан-дионато}оксованадия

В продолжение изучения химического поведения производных АрПК в реакциях комплексообразования, а также с целью синтеза биологически активных соединений впервые исследовано взаимодействие метиловых эфиров 3, 4-метил-фениламидов 4, 2(3)-пиридиламидов и 2-(5-R-1,3,4-тиадиазолил)амидов АрПК 5 с ванадила сульфатом (VOSO4). Синтез осуществляли в водно-спиртовой среде при температуре 20-25°С и соотношении реагентов 2:1, в результате чего получены соответственно бис(3-арил-1-метоксикарбонил-1,3-пропандионато)оксо-ванадий (8а-г), бис[3-арил-1-(4-метилфенил)карбоксамидо-1,3-пропандиона-то]оксованадий (9а-г), биc{3-арил-1-[2(3)-пиридил]карбоксамидо-1,3-пропан-дионато}оксованадий и биc{3-арил-1-[2-(5-R-1,3,4-тиадиазолил)]карбоксамидо-1,3-пропандионато}оксованадий (10 а-ф):

В ИК-спектрах соединений 8-10 присутствуют полосы поглощения валентных колебаний сложноэфирных групп (у хелатов 8) в области 1725-1735 см-1 или NH-групп и амидных карбонилов (у хелатов 9,10) в области 3240-3300 см-1 и 1680-1700 см-1 соответственно, а также групп С4=О и С=С связей в области 1545-1610 см-1, группы V=O в области 935-1030 см-1 и связей V-O в области 750-810 см-1. Сдвиг полосы поглощения групп С4=О в область низших частот на 10-25 см-1, по сравнению с таковой у исходных лигандов, свидетельствует об учас-тии этих групп в образовании более прочной координационной связи с ванадием (IV).

Согласно полученным спектральным характеристикам, данным атомно-абсорбционного анализа, масс-спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой, количественного анализа, производные АрПК 8-10 в реакциях комплексообразования координируются ванадием (IV) как бидентатные О-О лиганды.

2.2.2. Скрининг гипогликемической активности оксованадиевых комплексов на основе производных АрПК с оценкой острой токсичности и выявление зависимости «структура-активность»

Изучение острой токсичности показало, что вещества 8а-г,9а,в,г,10а-ф могут быть отнесены к 4 классу, а хелат - к 5 классу опасности согласно ГОСТу Р 53856-2010. При этом токсичность хелатов существенно меньше, чем у исходных лигандов 3-5, неорганического соединения ванадия (VOSO4) и метформина, что свидетельствует о высоком профиле безопасности синтезированных металлокомплексов 8-10.

При изучении гипогликемической активности соединений 8-10 установлено, что из 28 изученных металлокомплексов 20 хелатов обладают гипогликемическими свойствами различной степени выраженности (рис. 3). При этом соединения 9б,9г в 1,1-1,3 раза превосходят по активности метформин на 2-м часе наблюдения и действуют наравне с эталоном на 30 минутах опыта. Специфичес-кий эффект металлокомплекса сопоставим с таковым у эталона во все сроки наблюдения. Хелаты 8б,10а, хотя и уступают метформину, активны на уровне ванадила сульфата. У остальных соединений гипогликемические свойства выражены либо слабее, чем у метформина, либо отсутствуют.

Примечание: *=р<0,05, **=p<0,01, ***=p<0,001; 1 – по отношению к контролю (алл.д.), 2 – по отношению к метформину, 3 – по отношению к ванадила сульфату.

Рис. 3. Сравнительная характеристика гипогликемической активности оксованадиевых комплексов производных АрПК 8-10, метформина и ванадила сульфата.

Сравнительные результаты гипогликемического действия наиболее активных соединений 8,9 представлены на рис. 4.

Рис. 4. Сравнительная характеристика гипогликемического действия наиболее активных оксованадиевых металлокомплексов, ванадила сульфата и метформина.

Таким образом, целенаправленная химическая модификация производных АрПК 3,4 путем введения ванадия (IV) приводит к существенному росту гипогликемической активности в рядах соответствующих хелатов 8,9 - отмечено значительное потенцирование эффекта, по сравнению с исходными лигандами (от 1,4 до 40 раз) (рис. 5).

Рис. 5. Сравнительная характеристика гипогликемического действия наиболее активных оксованадиевых комплексов и исходных производных АрПК.

Анализ связи «структура - гипогликемическое действие» соединений 8-10 показал, что наибольший эффект присущ оксованадиевым комплексам, не содержа-щим в структуре гетероциклического фрагмента (хелатам 8,9). Установлено, что на выраженность действия влияет наличие заместителя в пара-положении бензольного кольца фрагмента кислоты. В случае его присутствия наблюдается усиление гипогликемических свойств в ряду метиловых эфиров 8б-г и 4-метилфе-ниламидов АрПК 9б-г, при этом наиболее выраженную активность проявляет хелат с электроноакцепторным заместителем. В ряду комплексов гетариламидов 10 больший эффект проявляют хелаты на основе незамещенных 2(3)-пири-диламидов АрПК 10а,10д. Отмечено, что включение оксованадия в структуру гетариламидов АрПК с 5-R-1,3,4-тиадиазольным фрагментом 10и-ф приводит к уменьшению гипогликемической активности, вплоть до ее исчезновения.

Для выявленных высокоэффективных и малотоксичных соединений 6е,6м, 7а,7б,7в,8б,8в,9б,9г представляло интерес расширить спектр фармакологических исследований.

Глава 3. Расширенные фармакологические исследования комплексного влияния на некоторые звенья патогенеза сахарного диабета наиболее активных производных АрПК

Учитывая, что важным аспектом влияния антидиабетических препаратов является воздействие на центральную нервную систему (ЦНС), нами изучено влияние активных веществ, а также ванадила сульфата и метформина на ее функции с помощью стандартных психофармакологических тестов: «открытое поле (ОП)», «условная реакция пассивного избегания» (УРПИ), «горячая пластинка (ГП)», по которым судили, соответственно, о влиянии на индивидуальное поведение, сохранность и воспроизведение памятного следа и болевую чувствительность животных. Эксперименты проводились на интактных животных (ОП, УРПИ, ГП) и крысах с аллоксановым СД (ОП, УРПИ). Исследуемые соединения вводили перорально в дозе 50 мг/кг в виде взвеси в 2% крахмальном растворе за 1 час до проведения экспериментов. В контроле использовали эквиобъемное количество крахмальной слизи. В качестве препаратов сравнения использовали пирацетам (тест УРПИ) и метамизол натрия (тест ГП) в дозе 50 мг/кг.

Анализ влияния исследуемых веществ на ЦНС с выявлением взаимосвязи «структура-нейротропная активность» показал, что у бутеноатов 6 характер воздействия напрямую зависит от строения гетероцикла. Так, наличие в структуре бензотиазола у вещества способствует нормализации поведенческих реакций у животных на фоне СД, улучшению способности к обучению здоровых крыс (рис. 6) без изменения индивидуального поведения и достоверному увеличению порога болевой чувствительности (рис. 7).

Рис. 6. Влияние активных соединений, ванадила сульфата, метформина и пирацетама на сохранность УРПИ лабораторных животных.

Замена бензотиазола на 5-метил-1,3,4-тиадиазол нивелирует указанные эффекты у соединения (рис. 6,7) и способствует возникновению поведенческой депрессии у здоровых животных.

В случае металлокомплексных соединений 7,8,9, на поведение, память, порог болевой чувствительности экспериментальных животных значимое влияние оказывает характер металла, и наибольшую активность проявляют оксованадиевые хелаты 8,9. Так, кадмиевый хелат оказывает негативное влияние на когнитивные функции (рис. 6) и ориентировочно-исследовательскую активность здоровых животных, слабо увеличивая порог болевой чувствительности (рис. 7).

Примечание: *= p < 0,05, ** = p < 0,01, *** = p < 0,001;

1 - по отношению к контролю; 2 - к метамизолу натрия.

Рис. 7. Сравнительная характеристика анальгетической активности изученных соединений и метамизола натрия

Комплексные соединения цинка 7, независимо от строения лиганда, устраняют поведенческую депрессию животных на фоне экспериментального СД, при этом не изменяя индивидуальное поведение здоровых животных, а также проявляют анальгетический эффект на уровне метамизола натрия (рис. 7). При этом хелат способствует улучшению процессов обучения экспериментальных животных на уровне пирацетама (рис. 6).

Для оксованадиевых хелатов 8,9 отмечено, что влияние на ЦНС напрямую зависит от структуры лиганда, и по совокупности свойств наиболее активны производные ариламидов АрПК 9. Так, хелаты , на основе метиловых эфиров АрПК, независимо от характера заместителя в арильном фрагменте угнетают поведенческие реакции как у крыс с СД, так и у здоровых животных, что, возможно, способствует увеличению порога болевой чувствительности (рис. 7). При этом исследуемые хелаты не оказывают негативного влияния на когнитивные функции экспериментальных животных (рис. 6). В свою очередь, оксованадиевые комплексы на основе 4-метилфениламидов АрПК , также, независимо от характера заместителя арильного фрагмента кислоты, устраняют депрессивно-подобное поведение у крыс с СД, не влияя при этом на индивидуальное поведение здоровых животных. Они способствуют усвоению и сохранению условного навыка у экспериментальных животных (рис. 6) и проявляют обезболивающее действие средней степени выраженности (рис. 7).

Следует отметить, что ванадила сульфат и метформин не улучшают поведенческие реакции у животных с СД, не способствуют улучшению когнитивных функций у здоровых животных (рис. 6), кроме того гипогликемический препарат вызывает у них расстройства мотивированного поведения, что указывает на определенные преимущества соединений ,,,, по изученным эффектам.

Антигипоксическое действие активных соединений, ванадила сульфата и метформина изучали на модели нормобарической гипоксии с гиперкапнией на белых нелинейных мышах. Исследуемые вещества и пирацетам вводили перорально в дозе 50 мг/кг в виде взвеси в 2% крахмальном растворе.

Установлено, что наибольшую активность проявляют оксованадиевые комплексы ,, которые уступают по силе действия пирацетаму, однако значительно превышают эффект ванадила сульфата и метформина (рис. 8). На выраженность действия не оказывает значимого влияния характер заместителя при С1, при этом увеличение активности среди металлокомплексов 8 наблюдается при наличии в арильном фрагменте электронодонорного радикала, а для хелатов 9 – электроноакцепторного заместителя. Цинковые хелаты 7а,7б и бутеноатуступают по выраженности эффекта препарату сравнения и соединениям ванадия, но значительно превосходят действие метформина.

Примечание: *= p < 0,05; ** = p < 0,01; *** = p < 0,001; 1- по отношению к контролю; 2 - по отношению к пирацетаму; 3- по отношению к метформину, 4- по отношению к VOSO4.

Рис. 8. Сравнительная характеристика антигипоксического действия активных соединений, ванадила сульфата, метформина и пирацетама.

Сравнительный анализ результатов показал, что наиболее перспективными для дальнейших исследований являются комплексные соединения оксованадия 9б,9г и цинка 7а,7б, а также бутеноат гетариламмония , в связи с выявлением у них комбинированного типа действия, что проявляется выраженной гипогликемической активностью и устранением расстройств мотивированного поведения у крыс с СД, отсутствием негативного влияния на поведенческие реакции и память здоровых животных, а также наличием антигипоксических и анальгетических свойств (табл.1).

Таблица 1

N ЛД50 Доза от ЛД50 Торможение гипергликемии, % Влияние на функции центральной нервной системы Антигипоксическая активность
индивидуальное поведение (ОП) Влияние на память (УРПИ) Увеличение порога болевой чувствительности
контроль алл. диабет
30 мин 2 часа ДА ОИА ТЖ ДА ОИА ТЖ
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
>1500 0,033 54,3 63,8 - - - - - + -
>500 0,100 39,8 63,7 - - - - - +++ +
>1500 0,033 66,5 68,6 - - - - - +++ +
2000 0,025 52,7 63,2 - - - - +++ +
2000 0,025 58,8 67,4 - - - - - + -
>1300 0,038 22,7 42,0 - - - ++++ +
>1300 0,038 34,9 45,8 - - - ++++ ++
2820 0,018 48,8 69,0 - - - - ++ ++
>2000 0,025 38,4 62,2 - - - ++ +
ВС 98 0,510 19,0 43,4 - - - - - - - +
МФ 1266 0,039 43,7 54,5 - - - - - -

Сравнительная характеристика комплексного влияния исследуемых соединений на патогенетические звенья СД

Примечание: + - эффект слабой степени выраженности; ++ - эффект средней степени выраженнос-ти; +++ - эффект на уровне эталона; ++++ - эффект превосходит эталон; - стимулирующий эффект; - угнетающий эффект; «-» - отсутствие значимого эффекта; … - исследования не проводились; ДА – двигательная активность; ОИА – ориентировочно-исследовательская активность; ТЖ – тревожность животных; ВС – ванадила сульфат; МФ – метформин.

Определенные преимущества по выраженности изученных эффектов отмечены у оксованадиевого комплекса , который был выбран для дальнейших исследований на иммунную систему, с учетом большого значения иммунопатологических реакций в развитии СД и его осложнений.

О реакции иммунной системы на воздействие хелата , ванадила сульфата и метформина судили по изменению уровня Т-, В-лимфоцитов, числа лимфоцитов, участвующих в реакции аутологичного розеткообразования, количества циркулирующих иммунных комплексов, а также показателей фагоцитоза в крови интактных животных и крыс с аллоксановым диабетом. Исследуемые соединения вводили в дозе 50 мг/кг в виде взвеси в 2% крахмальном растворе за час до проведения экспериментов.

Установлено, что хелат , ванадила сульфат и метформин проявляют иммуномодулирующие свойства, однако металлокомплекс имеет перед ними ряд преимуществ. Исследуемые вещества характеризуются в равной степени нормализацией количества Т- и В-лимфоцитов (рис. 9). У них отмечено фагоцитозстимулирующее действие, при этом наиболее выраженный эффект по показателям поглотительной способности нейтрофилов наблюдается при введении комплекса .

Примечание: *= p < 0,05, ** = p < 0,01, *** = p < 0,001;

1 - по отношению к контролю (интакт), 2 – к контролю (алл.д.).

Рис. 9. Влияние соединения , ванадила сульфата и метформина на количество Т-лим-фоцитов и В-лимфоцитов.

Кроме того, изучаемый хелат и ванадила сульфат уменьшают выраженность аутоиммунных процессов, что характеризуется уменьшением количества аутологичных розеткообразующих клеток и уровня циркулирующих иммунных комплексов (рис. 10), в то время как метформин не оказывает значимого влияния на аутореактивность Т-лимфоцитов.

Примечание: *= p < 0,05, ** = p < 0,01, *** = p < 0,001;

1 - по отношению к контролю (интакт), 2 – к контролю (алл.д.)

Рис. 10. Влияние соединения 9б, ванадила сульфата и метформина на количество циркулирующих иммунных комплексов.

Таким образом, проведенное исследование показало перспективность синтеза и поиска новых высокоэффективных и безопасных гипогликемических средств с комплексным спектром действия среди производных 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот и, в частности, их металлокомплексных соединений и гетариламмониевых солей. Выявлены малотоксичные вещества, обладающие выраженной гипогликемической активностью, а также антигипоксическим, анальгетическим действием, восстанавливающие индивидуальное поведение и память экспериментальных животных, при этом у метформина данных эффектов не отмечено. У соединения с наиболее выраженным комплексным антидиабетическим действием показано наличие иммунофармакологической активности. Тем самым, расширено представление о фармакологических свойствах производных АрПК, дана их сравнительная характеристика с препаратами, применяемыми в качестве гипогликемических, ноотропных и анальгетических средств. Полученные данные научно обосновывают проведение углубленных фармакологических исследований для наиболее активного бис[3-(4-хлорфенил)-1-(4-метилфенил)карбоксамидо-1,3-пропандионато]оксованадия ().

ГЛАВА 4. Экспериментальная часть

    1. Экспериментальная химическая часть

В разделе приведены методики получения соединений, описанных в работе.

4.2. Экспериментальная биологическая часть

Фармакологические эксперименты проведены на 576 белых нелинейных мышах массой 18-25 г и 938 белых нелинейных крысах массой 180-280 г обоего пола по стандартным методикам, в соответствии с требованиями Фармакологического комитета.

Статистическая обработка результатов осуществлена при помощи статистических программ Windows XP (Excel) с использованием параметрического t-критерия Стьюдента. Различия считали достоверными при уровне р < 0,05.

ВЫВОДЫ

  1. Реакцией комплексообразования на основе производных 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот с ванадила сульфатом впервые получены соответствующие оксованадиевые комплексы и подтверждено, что исходные реагенты координируются металлом как бидентатные О-О лиганды.
  2. Среди 84-х изученных производных 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот достоверный гипогликемический эффект различной степени выраженности отмечен у 56 малотоксичных соединений. Для расширенных фармакологических исследований выбраны 9 наиболее активных веществ среди 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеноатов гетариламмония, комплексных соединений цинка и кадмия на основе гетариламидов АрПК и хелатов оксованадия на основе метиловых эфиров и ариламидов АрПК.
  3. Четыре металлокомплекса цинка и оксованадия (бис[3-(4-хлорфенил)-1-(5-бром-2-пиридил)карбоксамидо-1,3-пропандионато]цинк, бис[3-фенил-1-(3-пиридил)карбоксамидо-1,3-пропандионато]цинк, бис[3-(4-хлорфенил)-1-(4-метилфенил)-карбоксамидо-1,3-пропандионато]оксованадий, бис[3-(4-ме-токсифенил)-1-(4-метилфенил)карбоксамидо-1,3-пропандионато]оксована-дий) и 2-гидрокси-4-оксо-4-фенил-2-бутеноат 2-бензотиазолиламмония оказывают положительное влияние на функции ЦНС, что проявляется устранением депрессивно-подобного поведения у крыс с экспериментальным диабетом, отсутствием негативного влияния на поведенческие реакции и условно-рефлекторную деятельность здоровых животных, увеличением порога болевой чувствительности, а также обладают антигипоксической активностью, в то время как гипогликемический препарат сравнения – метформин указанных эффектов не проявляет.
  4. Определены некоторые зависимости гипогликемической, антигипоксической активности, влияния на ЦНС от химической структуры изученных соединений, которые могут быть использованы в дальнейшем синтезе и поиске антидиабетических веществ среди производных 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот. Установлено, что введение оксованадия в структуру метиловых эфиров и ариламидов АрПК потенцирует гипогликемический эффект соединений.
  5. Бис[3-(4-хлорфенил)-1-(4-метилфенил)карбоксамидо-1,3-пропандионато]ок-сованадий проявляет иммунофармакологическую активность, что характеризуется восстановлением соотношения субпопуляций Т-, В-лимфоцитов, стимуляцией фагоцитоза, а также уменьшением выраженности аутоиммунных нарушений у животных с экспериментальным диабетом. Это позволяет рекомендовать его к дальнейшему углубленному изучению в качестве потенциального антидиабетического средства с комплексным влиянием на различные звенья патогенеза сахарного диабета и его осложнений.

Основное содержание работы представлено в публикациях:

  1. Патент 2412177 РФ. МПК: C07D 277/82, A61K 31/428. 2-Гидрокси-4-оксо-4-фенил-2-бутеноат бензотиазолиламмония, обладающий гипогликемической активностью / Н.А. Пулина, В.В. Юшков, Т.А. Юшкова, Ф.В. Собин, А.И. Краснова [и др.]. - № 2009100631/04; – заявл. 11.01.2009; опубл. 20.02.2011, Бюл. №5.
  2. Положительное решение о выдаче патента по заявке № 2010100531/04(000636) МПК C07F 9/00, А61К 31/28, А61Р 3/10. Бис[3-(4-хлорфенил)-1-(4-метилфенил)карбоксамидо-1,3-пропандионато]оксованадий, обладающий гипогликемической и антигипоксической активностью / Н.А. Пулина, Т.А. Юшкова, А.И. Краснова, В.В. Юшков (РФ). – заявлено 11.01. 2010.
  3. Синтез, гипогликемическая и противовоспалительная активность комплексных соединений на основе N-гетариламидов 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот / Н.А. Пулина, Ф.В. Собин, А.И. Краснова [и др.] // Хим.-фарм. журн. – 2011. - Т. 45, № 5. – С. 124-127.
  4. Юшкова, Т.А. Об иммунофармакологической активности органических соединений ванадия у крыс с экспериментальным диабетом / Т.А. Юшкова, А.И. Краснова // Вестник Урал. медиц. академ. науки. - 2010. - №2/1(29). - С. 237-238.
  5. Направленный поиск гипогликемических соединений в ряду производных ароилпировиноградных кислот / Н.А. Пулина, Т.А. Юшкова, А.И. Краснова [и др.] // Вестник РУДН. Сер. Медицина. – 2010. – № 4. – С. 423-425.
  6. Гипогликемическая активность производных ароилпировиноградных кислот / Н.А. Пулина, Т.А. Юшкова, А.И. Краснова [и др.] // Фармация. - 2009. - № 7. - С. 37-38.
  7. Hypoglycemic activity at derivatives of 4-aril-2-hydroxy-4-oxo-2-butenoic acids / T.A. Yushkova, N.A. Pulina, V.V. Yushkov, A.I. Krasnova // Abstracts of paper the 3rd China-Russia International Symp. on Pharmacology. - Harbin, 2008. - P. 21-22.
  8. Hypoglycemic activity at derivatives of 4-aryl-2-hydroxy-4-oxo-butenoic acids / V.V. Yushkov, N.A. Pulina, A.I. Krasnova // Asian J. Pharmacodynam. Pharmakokinet. – 2008. – Vol. 8, № 3. – Р.169.
  9. Краснова, А.И. Влияние метформина на индивидуальное поведение у крыс с аллоксановым диабетом / А.И. Краснова, С.В. Шмыкова // Современное состояние и пути оптимизации лекарственного обеспечения населения: материалы Рос. науч.-практ. конф. ПГФА. – Пермь, 2008. – С. 300-302.
  10. О гипогликемической активности производных 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот / А.И. Краснова, Т.А. Юшкова, Н.А. Пулина [и др.] // Фармакология и токсикология фосфорорганических соединений и других биологически активных веществ: материалы Росс. конф., посв. 75-летию проф. И.А. Студенцовой. – Казань, 2008. – С. 43.
  11. Синтез и гипогликемическая активность в ряду новых производных 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот / Н.А. Пулина, В.В. Юшков, Ф.В. Собин, Т.А. Юшкова, А.И. Краснова [и др.] // Современное состояние и пути оптимизации лекарственного обеспечения населения: материалы Росс. науч.-практ. конф. ПГФА. – Пермь, 2008. – С. 341-343.
  12. Гипогликемическая активность новых производных -оксокарбоновых кислот / А.И. Краснова, Т.А. Юшкова, В.В. Юшков [и др.] // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. Пятигор. гос. фарм. акад. – Пятигорск, 2009. – Вып. 64. – С. 455-456.
  13. О фармакологической активности метформина / С.В. Шмыкова, Д.Ю. Колташев, Б.А. Тарасов, А.И. Краснова // Вестник Перм. гос. фарм. акад. – Пермь, 2009. -№ 5. – С. 128-129.
  14. Краснова, А.И. О фармакологической активности производных -оксокар-боновых кислот / А.И. Краснова, К.В. Яценко // Фармация в ХХI веке: эстафета поколений: тез. докл. межвуз. науч. конф. – СПб, 2009. – С.100-101.
  15. Поиск новых антидиабетических веществ среди производных ароилпировиноградных кислот / А.И. Краснова, Т.А. Юшкова, В.В. Юшков [и др.] // Человек и лекарство: тез. докл. ХVI Рос. Нац. Конгр. : М., 2009. – С. 680-681.
  16. Синтез биологически активных органических соединений ванадия / А.И. Краснова, Н.А. Пулина, Т.А. Юшкова [и др.] // Химия поликарбонильных соединений: материалы регион. науч.-практ. молодеж. школы-конф. – Пермь: Изд-во ПГУ, 2009. – С. 40-41.
  17. Синтез и фармакологическая активность оксованадиевых комплексов производных ароилпировиноградных кислот / Н.А. Пулина, Т.А. Юшкова, А.И. Краснова [и др.] // Вестник Перм. гос. фарм. акад. - Пермь, 2010. - №6. - С. 138-141.
  18. Синтез биологически активных комплексов ванадия (IV) на основе N-(гет)ариламидов 4-арил-2-гидрокси-4-оксо-2-бутеновых кислот / А.И. Краснова, Н.А. Пулина, Ф.В. Собин [и др.] // Актуальные проблемы органического синтеза и анализа. – 2010. – Екатеринбург: НИСО УрО РАН. – С. 23-28.
  19. Krasnova, A.I. Synthesis of biologically active zinc and vanadium complexes based on N-heterylamides of 4-aryl-2-hydroxy-4-oxo-2-butenoic acids / A.I. Krasnova, N.A. Pulina, F.V. Sobin // International symposium "Advanced science in organic chemistry", Miskhor, 2010. - Book of Abstracts. - Р. 112.

Автор выражает благодарность зав. кафедрой аналитической химии ПГУ, д.х.н., проф. М.И. Дегтеву за помощь в проведении количественного анализа, научному сотруднику РИЦ «Фарматест» Е.Б. Бабушкиной за запись ИК-спектров, к.х.н., доценту кафедры токсикологической химии ПГФА Л.Н. Карповой за запись масс-спектров синтезированных соединений, а также за консультативную помощь д.м.н., проф. каф. фармакологии ПГФА В.В. Юшкову, к.х.н., доценту кафедры природных и биологически активных соединений ПГУ А.Е. Рубцову и старшему преподавателю каф. фармацевтической технологии ПГФА Ф.В. Собину.



 


Похожие работы:

«Зубкова Наталия Васильевна Биотехнологические аспекты вирусной безопасности препаратов и ммуноглобул и нов: мет о долог ия, производство, стандартизация 14.04.01- технология получения лекарств Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора фармацевтических наук Пермь - 2012 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном...»

«БАЛАХОНОВА Елена Геннадьевна МЕТОДИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ К ОПТИМИЗАЦИИ ЛЕКАРСТВЕННОГО ОБЕСПЕЧЕНИЯ ЖИТЕЛЕЙ СЕЛЬСКИХ НАСЕЛЕННЫХ ПУНКТОВ 14.04.03 – организация фармацевтического дела Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Пермь – 2012 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Пермская государственная фармацевтическая академия Министерства здравоохранения и социального...»

«джупарова ирина алексеевна Теоретические и методические основы построения фармакогеографической модели модернизации системы управления лекарственным обеспечением больных социально значимыми заболеваниями на региональном уровне 14.04.03 – Организация фармацевтического дела автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора фармацевтических наук Москва – 2013 Работа выполнена в Государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования...»

«ШАБАЛКИНА ЕЛЕНА ЮРЬЕВНА НАНОДИСПЕРСНЫЕ МАГНИТОМЯГКИЕ МАТЕРИАЛЫ КАК КОМПОНЕНТЫ ТЕПЛОПРОВОДЯЩИХ СРЕД ДЛЯ МАГНИТОКРИОВОЗДЕЙСТВИЙ 14.04.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание учёной степени кандидата фармацевтических наук Москва – 2010 Работа выполнена в ГОУ ВПО Московская медицинская академия имени И. М. Сеченова Научные руководители: доктор химических наук, профессор Харитонов Юрий Яковлевич доктор фармацевтических наук, профессор...»

«Буланкин Денис Георгиевич ИССЛЕДОВАНИЕ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ И РАЗРАБОТКЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ НА ОСНОВЕ ЛИСТЬЕВ ГИНКГО ДВУЛОПАСТНОГО ( GINKGO BILOBA L.) 14.04.02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Самара – 2011 Диссертационная работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Самарский государственный медицинский университет Министерства...»

«КОРЕНСКАЯ ИРИНА МИХАЙЛОВНА ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ СЕМЯН РАЗЛИЧНЫХ СОРТОВ АМАРАНТА ПЕЧАЛЬНОГО ( AMARANTHUS HYPOCHONDRIACUS L.) Специальность 14.04.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Пермь – 2012 Работа выполнена в Федеральном государственном бюджетном образовательном учреждении высшего профессионального образования Воронежский государственный университет Министерства образования и...»

«ЕГОРОВА ЕЛЕНА ИВАНОВНА ИССЛЕДОВАНИЕ ЗОЛПИДЕМА В химико-токсикологическом отношении 14.04.02 — фармацевтическая химия, фармакогнозия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Пермь 2011 Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Пермская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию. Научный руководитель: доктор...»

«Яровиков Геннадий Сергеевич Разработка организационно-методического подхода к совершенствованию аптечного мерчандайзинга (на примере государственного унитарного предприятия Медицинская техника и фармация Татарстана) 14.04.03 – Организация фармацевтического дела автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Пермь – 2011 Диссертационная работа выполнена в ГБОУ ВПО Казанский государственный медицинский университет Минздравсоцразвития России...»

«РЫЛИНА ЕЛЕНА ВАЛЕРЬЕВНА ОПРЕДЕЛЕНИЕ ИНДИКАТОРНЫХ ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ НЕФЛАВОНОИДНОЙ ПРИРОДЫ В ЛЕКАРСТВЕННОМ И ПИЩЕВОМ РАСТИТЕЛЬНОМ СЫРЬЕ МЕТОДОМ ВЭЖХ 14.04.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук МОСКВА – 2010 Работа выполнена в ГОУ ВПО Первый Московский Государственный Медицинский Университет имени И.М. Сеченова Научные руководители: Академик РАМН, доктор фармацевти- ческих наук,...»

«ПЯТИГОРСКАЯ Наталья Валерьевна ИССЛЕДОВАНИЯ И МЕТОДОЛОГИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ СОЗДАНИЯ СОВРЕМЕННЫХ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИХ ПРЕДПРИЯТИЙ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 14.04.01 – технология получения лекарств 14.04.03 – организация фармацевтического дела АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени доктора фармацевтических наук Москва – 2011 г. Работа выполнена в ГОУ ВПО Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова. Научные консультанты: Доктор фармацевтических...»

«Валиева Екатерина Марсиловна Разработка подходов к оптимизации обеспечения детей фармацевтическими средствами, содержащими пробиотики 14.04.03 – Организация фармацевтического дела автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Пермь – 2012 Диссертационная работа выполнена в ГБОУ ВПО Казанский государственный медицинский университет Минздравсоцразвития России Научный руководитель: Доктор фармацевтических наук, профессор Егорова Светлана...»

«ЛЕБЕДЕВА НАТАЛЬЯ НИКОЛАЕВНА РАЗРАБОТКА КОМПЛЕКСНОГО ПОДХОДА К ОБНАРУЖЕНИЮ ФАЛЬСИФИЦИРОВАННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ГРУППЫ ЦЕФАЛОСПОРИНОВ 14.04.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозия АВТОРЕФЕРАТ...»

«ВОСТРИКОВА ТАТЬЯНА ВЛАДИМИРОВНА ОРГАНИЗАЦИОННО-МЕТОДИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ К ОПТИМИЗАЦИИ ЛЕКАРСТВЕННОГО ОБЕСПЕЧЕНИЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ЙОДОДЕФИЦИТНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ НА РЕГИОНАЛЬНОМ УРОВНЕ Специальность 14.04.03. – организация фармацевтического дела АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Пермь – 2011 Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Алтайский государственный медицинский...»

«Собин Фёдор Владимирович СИНТЕЗ, СВОЙСТВА И БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ СОЕДИНЕНИЙ НА ОСНОВЕ ХИМИЧЕСКИХ ПРЕВРАЩЕНИЙ n -ГЕТЕРИЛАМИДОВ 4 -АРИЛ-2-ГИДРОКСИ-4-ОКСО-2-БУТЕНОВЫХ КИСЛОТ 14.04.02 – фармацевтическая химия, фармакогнозия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Пермь – 2011 Работа выполнена в ГОУ ВПО Пермская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному...»

«ЗИНЧУК ИЛЬЯ ЮРЬЕВИЧ ОПТИМИЗАЦИЯ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ПОМОЩИ БОЛЬНЫМ РЕВМАТОИДНЫМ АРТРИТОМ НА ОСНОВЕ ФАРМАКОЭКОНОМИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ Специальность 14.04.03 – организация фармацевтического дела Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Москва – 2013 Работа выполнена в ГБОУ ВПО Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации. Научный руководитель: доктор...»

«БАЛЫКЛОВА КСЕНИЯ СЕРГЕЕВНА НОВЫЕ МЕТОДЫ В ОЦЕНКЕ КАЧЕСТВА СУЛЬФАНИЛАМИДОВ (ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНАЯ СКАНИРУЮЩАЯ КАЛОРИМЕТРИЯ, ТЕРМОГРАВИМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ, НАРУШЕННОЕ ПОЛНОЕ ВНУТРЕННЕЕ ОТРАЖЕНИЕ, БЛИЖНЯЯ ИНФРАКРАСНАЯ СПЕКТРОСКОПИЯ) 14.04.02 – Фармацевтическая химия, фармакогнозия Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Москва – 2011 Работа выполнена в ГОУ ВПО Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М.Сеченова...»

«Раева Анастасия Анатольевна ИЗУЧЕНИЕ МЕТАБОЛОМА ЛИСТЬЕВ БЕРЕЗЫ С ЦЕЛЬЮ СОЗДАНИЯ ЛЕКАРСТВЕННОГО ПРЕПАРАТА 14.04.01 – Технология получения лекарств Автореферат Диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Москва 2010 Диссертационная работа выполнена во Всероссийском научно-исследовательском институте лекарственных и ароматических растений (ВИЛАР) РАСХН. Научный руководитель: Доктор фармацевтических наук, профессор Демина Наталья Борисовна Официальные...»

«БАРИНСКАЯ Татьяна Оскаровна ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ КИНЕТИКИ ЭТАНОЛА В КРОВИ, ВЫДЫХАЕМОМ ВОЗДУХЕ, СЛЮНЕ И МОЧЕ (К МЕДИЦИНСКОМУ ОСВИДЕТЕЛЬСТВОВАНИЮ НА СОСТОЯНИЕ ОПЬЯНЕНИЯ) 14.04.02 - фармацевтическая химия, фармакогнозия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Москва, 2011 Работа выполнена в ФГУ Российский центр судебно-медицинской экспертизы Министерства здравоохранения и социального развития РФ Научный руководитель:...»

«Старцева Людмила Викторовна ИССЛЕДОВАНИЯ ПО РАЗРАБОТКЕ И СТАНДАРТИЗАЦИИ растител ь нОГО средствА С ПРОТИВОЯЗВЕННОЙ АКТИВНОСТЬЮ 14.04.02 – ф армацевтическая химия, фармакогнозия АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Самара - 2011 Работа выполнена в Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования Башкирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и...»

«ДУДАРЕНКОВА Марина Рудольфовна РАЗРАБОТКА ОРГАНИЗАЦИОННО-ЭКОНОМИЧЕСКИХ ПОДХОДОВ К АПТЕЧНОМУ ИЗГОТОВЛЕНИЮ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ НА ТЕРРИТОРИАЛЬНОМ УРОВНЕ (НА ПРИМЕРЕ ОРЕНБУРГСКОЙ ОБЛАСТИ) 14.04.03 организация фармацевтического дела Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук Научный руководитель: кандидат фармацевтических наук, доцент ГЛАДУНОВА Елена Павловна Пермь - 2011 Работа выполнена в ГБОУ ВПО Самарский государственный...»






 
2014 www.avtoreferat.seluk.ru - «Бесплатная электронная библиотека - Авторефераты диссертаций»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.